近日，昆明医科大学第二附属医院曹霞教授团队联合上海同济大学附属东方医院康传媛教授团队以及美国加州大学，韩国延世大学科学家团队，在自闭症领域的著名杂志《Research in Autism Spectrum Disorder》（JCR Q1）上发表了题为“TH1/Treg ratio may be a marker of autism in children with immune dysfunction”的研究文章。该研究表明了部分ASD儿童体内存在免疫功能失衡，ASD儿童行为异常的严重程度与促炎与抗炎T细胞的比率（Teff/Treg）呈正相关，Teff/Treg 比率较高的ASD患儿往往表现出更严重的行为异常。
本研究收集了来自中国云南地区的82名确诊自闭症且未接受过药物治疗的ASD患儿以及50名性别，年龄匹配的健康对照儿童的外周血，利用流式细胞术及高通量细胞因子检测技术对ASD患者及健康对照儿童的外周血淋巴细胞亚群及相应细胞因子探究了ASD患儿的外周免疫功能。同时，利用儿童孤独症（自闭症）评定量表(Childhood Autism Rating Scale, CARS)，克氏孤独症行为量表（Clancy Autism Behavior Scale，CABS），孤独症儿童行为量表(Autism behavior checklist, ABC)等6种专业评定量表对ASD患者的行为症状进行评估积分。
图1. (A) ASD组与正常对照组外周血中T淋巴细胞亚群百分比的比较
图1. (A) (a) TH1 (CD4+IFN-γ+), (b)TH2(CD4+IL-4+), (c) TH17 (CD4+IL-17A+), (d) Tc1(CD8+IFN-γ+), (e) Tc2(CD8+IL-4+), (f) Tc17(CD8+IL-17A+), (g) Treg (CD4+CD25+CD127dim) 细胞.
结果表明，部分自闭症（ASD）患儿外周血中的调节类T细胞（Treg）细胞的百分比水平低于健康对照组儿童。相反，ASD患儿外周血中的效应T细胞（Teff）如辅助型T细胞1（TH1）、 TH2、 TH17和细胞毒性T细胞1（Tc1）细胞的百分比增加。
图1. (B) ASD组与正常对照组外周血中T淋巴细胞亚群流式散点图
图1. (B)ASD组与正常对照组外周血淋巴细胞亚群流式散点图。(a) TH1 (CD4+IFN-γ+),(b)TH2(CD4+IL-4+),(c)TH17(CD4+IL-17A+),(d)Tc1(CD8+IFN-γ+),(e)Treg(CD4+CD25+CD127dim)细胞.
表2 ASD患儿与正常儿童外周血细胞因子表达情况
结果表明ASD患儿外周血中的TGF-β1水平低于健康对照组儿童。与正常对照组儿童相比，ASD儿童血浆中的促炎细胞因子如肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素4（IL-4）、白细胞介素5（IL-5）和白细胞介素17A（IL-17A）水平较高。
表3-5分别为ASD患者外周血的Teff/Treg 比率与CARS，CABS，ABC，CGSQ，HAD，AMSE量表评分的相关性分析
结果表明ASD儿童行为异常的严重程度与促炎与抗炎细胞（Teff/Treg）的比率存在相关性，Teff/Treg 比率较高的ASD患儿表现出更严重的行为异常。
图3：TH1/Treg 比率较高的ASD儿童TGF-β水平与CARS评分的相关性分析。
结果显示：从82例患者中筛选出44例TH1/Treg 较高的患者，其TGF-β水平与 CARS 评分呈负相关。TGF-β水平越低的患者往往表现出更严重的行为异常。
图4：受试者工作特征曲线（ROC）评价Teff/Treg比率在ASD患者的诊断能力
结果显示高比例Teff/Treg 可能是ASD诊断免疫功能障碍自闭症儿童的生物标志物，其中TH1/Treg表现出了较高的诊断价值。
该研究采用了流式细胞术及高通量细胞因子检测，研究了ASD患儿外周免疫功能的特征，TH1/Treg 细胞的不平衡可能作为 ASD 患儿免疫功能障碍的诊断标志物，同时这项研究还表明，与 Treg 细胞相关的免疫调节功能障碍可能会导致 ASD 更多的行为障碍。尽管目前还不清楚免疫功能失调是ASD的原因还是结果，但潜在的免疫生物标志物可能有助于ASD的预防、诊断和治疗。未来需要大规模的临床研究来验证这些发现，并根据免疫特征对 ASD 患者进行分类。
昆医大附二院中心实验室聂祖庆主管检验师，上海同济大学附属东方医院临床心理科韩冬，张琨医师为本文的共同第一作者。昆医大附二院曹霞教授及上海同济大学附属东方医院临床心理科康传媛教授为本文的共同通讯作者。该研究受到了国家自然科学基金、云南省卫生系统领军人才项目的资助。
文图：科技教育处
